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慢性淋巴細胞白血病缺失基因6蛋白抗體實驗步驟

發(fā)表時間:2021-09-16

        當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

慢性淋巴細胞白血病缺失基因6蛋白抗體實驗步驟:


1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。

2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。

4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

準備好試劑與儀器:

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
MSC, 小鼠雪旺細胞
MA, 小鼠星形膠質細胞
MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞
CSC, 小鼠心肌細胞
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞
NSC,大鼠神經(jīng)干細胞
RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓
RN-c, 大鼠皮質神經(jīng)元
RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元
RSC, 大鼠雪旺細胞
RA, 大鼠星形膠質細胞
RLF, 大鼠淋巴成纖維細胞
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞
rCSC, 大鼠心肌細胞
RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞
RLFs, 大鼠肺成纖維細胞
rCF, 大鼠心臟成纖維細胞
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元
mOPC, 小鼠少突膠質前體細胞
MA, 小鼠星形膠質細胞
MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞
CSC, 小鼠心肌細胞
小鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs)
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞
MM, 小鼠小膠質細胞
mCF, 小鼠心臟成纖維細胞
MN-c, 小鼠皮質神經(jīng)元
 細胞名稱
人絨毛膜毛細血管內(nèi)皮細胞
人羊膜上皮細胞
人絨毛間充質成纖維細胞



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