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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3410
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-12
- 更新日期: 2025-03-25
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3410 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
山羊RT-腦脊髓炎病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Caprine Arthritis-encephalitis Virus(CAEV)-(MVV) | LZR3410 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
卡坦正青霉PRF1 (Perforin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium katangense
摩洛哥芽孢桿菌PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
熱帶假絲酵母PPAR-γ (Peroxisome Proliferator-activated receptor γ) ELISA Kit拉丁屬名: Candida tropicalis
發(fā)狀孢囊游動放線菌PPAR-α (Peroxisome Proliferators-activator Receptors alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Actinoplanes capillaceus
秦氏蜜環(huán)菌PT-IgA (Pertussis virus IgA) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
灰耳擔(dān)布勒酵母PI Ab-IgG/IgM (phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 拉丁屬名: Auriculibuller fuscus
巴氏醋桿菌羅旺亞種PS (Phosphatidylserine) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacter pasteurianus subsp. lovaniensis
傘枝犁頭霉P-PKC (Phospho Protein Kinase C) ELISA Kit拉丁屬名: Absidia corymbifera
沙漠畢赤酵母pERK (Phospho-Extracellular Signal-Regulated Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia deserticola
黑曲霉PI3K2a (Phosphoinositide 3 Kinase 2a) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
葡萄座腔菌PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
芽孢桿菌屬PLAA (Phospholipase A1 Activating Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.
短芽孢桿菌LDLR (Low Density Lipoprotein Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus
仙臺鏈霉菌PLCg1 (Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit 用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性
阪崎克羅諾桿菌PI3K (Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Cronobacter sakazakii
山羊RT-腦脊髓炎病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Melamine/OVA(ovalbumin) 三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物Mg-ATP溶液(10mmol/L,pH7.4)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
chloramphenicol/BSA 氯霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白土貝母苷乙TubeiMoside II中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
chloramphenicol/OVA 氯霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白銀線草醇 DPropanoic acid,2-[(1aR,1bS,2R,4aR,4bS,8aS,9R,9aS,10aR,10bS,10cS,11bS)-9-[(acetyloxy)methyl]-1a,1b,2,3,4a,6,8,8a,9,9a,10,10a,10b,10c,11,11b-hexadecahydro-2-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-1b,10b-dimethyl-3,6-dioxocyclopropa[4,5]cyclopropa[4',5']cyclopent[1',2':7,8]acephenanthryleno[10a,10-b]furan-4(1H)-ylidene]-,methyl ester, (2Z)-對照藥材 分 子 式: C33H38O9 分 子 量:
Gentamicin/BSA 慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白5,7-二乙酰氧基黃酮4-Oxo-2-phenyl-4H-chromene-5,7-diyl diacetate對照藥材 分 子 式: C19H14O6 分 子 量: 338.31086
Gentamicin/OVA 慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白辛辣內(nèi)酯ASpiro[furo[2',3':5,6]cyclohepta[1,2-b]pyran-6(2H),6'(1'aH)-[5H]oxireno[4,5]cyclohepta[1,2-b]furan]-2,5'-dione,7-acetyl-2',3,3',3'a,3a,4,4a,6'a,7',7'a,8a,9,10,10a-tetradecahydro-8a-hydroxy-2',9-dimethyl-3-methylene-1'a-[(1E)-3-oxo-1-buten-1-yl]-,(1'aR,2'R,3'aS,3aR,4aR,6R,6'aR,7'aR,8aR,9S,10aR)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H34O9 分 子 量:
Tetracycline/BSA 四環(huán)素偶聯(lián)牛血清白蛋白曲克蘆丁trihydroxyethylrutin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C33H42O19 分 子 量: 742.68
Gentamicin/FITC 熒光素標(biāo)記慶大霉素漆黃素; 紫鉚素7,3,4-Trihydroxyflavanone化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H12O5 分 子 量: 272.25278