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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
休斯新孢子蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3893
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2025-03-17
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3893
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱(chēng)

英文名稱(chēng)

貨號(hào)

休斯新孢子蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

Neospora hughsi

LZR3893


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:

腐皮鐮孢菌IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

長(zhǎng)枝木霉CSF2Rα (Colony Stimulating Factor 2 Receptor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma longibrachiatum

鏈球菌(不定種)MRC1 (Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: sp.

北方蜜環(huán)菌Apo A1-Ab (Anti-Apolipoprotein A1 antibody) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌EREG (Epiregulin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

糙孢籃狀菌CC16 (Clara Cell 16KD Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Talaromyces trachyspermus

大腸埃希氏菌LDH (Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli

匍枝根霉(黑根霉)LIFR (Leukemia Inhibitory Factor Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus stolonifer

假絲酵母屬COL4 (Collagen Type IV) ELISA Kit拉丁屬名: Candida  sp.

黑柄多孔菌PAIg (Platelet Associated Immunoglobulins) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

柱枝雙孢霉VEGF165 (Vascular Endothelial Growth Factor165) ELISA Kit拉丁屬名: Calonectria kyotensis Terash.

產(chǎn)黃青霉HLA-A (Leukocyte Antigen A) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium chrysogenum

枯草芽孢桿菌TNNI1 (Troponin I Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

谷氨酸棒桿菌ERN1 (Endoplasmic Reticulum to Nucleus Signalling 1) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

大腸埃希氏菌FcγR3A (Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIa Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
休斯新孢子蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 FAM29A/HAUS6  FAM29蛋白抗體

E4F1  E4F轉(zhuǎn)錄因子1抗體

CHPT1  甘油二酯膽堿磷酸轉(zhuǎn)移酶抗體

BIN2/BRAP1  相關(guān)蛋白1抗體

B4GALT7/GlcNAc beta  半乳糖轉(zhuǎn)移酶7亞基β1,4抗體

FAM96B  FAM96B蛋白抗體

FAM82B  微管相關(guān)蛋白FAM82B抗體

 


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