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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3897
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-17
- 更新日期： 2025-03-17
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3897 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Nocardia brasiliensis | LZR3897 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
枯草芽孢桿菌NUP37 (Nucleoporin 37kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
根瘤菌BAD (Bcl2 Associated Death Promoter) ELISA Kit 用途: 固氮
游動球菌COL13 (Collagen Type XIII) ELISA Kit拉丁屬名: Planococcus sp.
大腸埃希菌TG (Thyroglobulin) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
芽孢桿菌屬HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.
平田頭菇ALDH (Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial) ELISA Kit用途: 食、藥用
微綠蠟質(zhì)菌GH (Growth Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Ceri aviridans
枯草芽孢桿菌枯草亞種PDPN (Podoplanin) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
釀酒酵母Methylase ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
PL12（平菇）FDP (Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
水生黃桿菌TNF-β (Tumor Necrosis Factor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium hydatis
運動節(jié)桿菌GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter agilis
抗生鏈霉菌PIK3Cσ (Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Delta Polypeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces antibioticus
紅細菌屬RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed and Secreted) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodobacter sp.
腐皮鐮刀菌BAK1 (Bcl2 Antagonist/Killer 1) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物
諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒 ANKRD50 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體
ATP6V1G2/V-ATPase G2 氫離子轉(zhuǎn)運ATP合成酶6G抗體
ATXN7L3B 7樣蛋白3B抗體
ANKRD26 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體
ANKRD26 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體
BAT5 白細胞抗原B相關轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體
Ephrin A2/LERK6 Ephrin A2抗體
