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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4037
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4037 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
牛瘟病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Rinderpest Virus | LZR4037 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
鹿皮色曲霉GIF (Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus cervinus
膠孢pERK ( Phospho Extracellular Signal Regulated Kinase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
擬莖點(diǎn)霉NEB (Noradrenaline Bitartas) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
米根霉BMG/β2-MG (Beta-2-Microglobulin) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus oryzae
槐栓菌Bcl-3 (B-cell Leukemia/Lymphoma 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
松針散斑殼MUC6 (Mucin 6) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
菊池鏈格孢Neo-T4 (Neonatal Thyroxine) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黑木耳IFABP/FABP2 (Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit用途: 產(chǎn)物
卷曲鏈霉菌IL-1ra (Interleukin 1 Receptor Antagonist) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces cirratus
厚環(huán)粘蓋牛肝菌PARC/CCL18 (Pulmonary Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
高地芽孢桿菌ENA-78 (Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus altitudinis
土曲霉TSP1 (Thrombin Sensitive Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus terreus
立枯絲核菌L-LDH (L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
日本山茶刺盤(pán)孢5-HIAA (5-Hydroxyindolacetic Acid) ELISA Kit拉丁屬名: Colletotrichum camelliae-japonicae
白酒 鄰苯二甲酸二異丁酯 DIBP、鄰苯二 甲酸二丁酯 DBP、鄰苯二甲酸二(4- 甲基-2-戊基)酯 BMPP、鄰苯二甲酸 二(2-乙氧基)乙酯 DEEP、鄰苯二 甲酸二戊酯 DPP、鄰苯二甲酸二己酯 DHXP、鄰苯二甲酸丁基芐基酯 BBP、 鄰苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯 DCHP、 鄰苯二甲酸二(α-乙基)己酯 DEHP、 鄰苯二甲酸二苯酯、鄰苯二甲酸二正 辛酯 DNOP、鄰苯二甲酸二甲酯 DMP、鄰苯二甲酸二乙脂(DEP)PRELP (Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein) ELISA Kit拉丁屬名: 白酒 鄰苯二甲酸二異丁酯 DIBP、鄰苯二 甲酸二丁酯 DBP、鄰苯二甲酸二(4- 甲基-2-戊基)酯 BMPP、鄰苯二甲酸 二(2-乙氧基)乙酯 DEEP、鄰苯二 甲酸二戊酯 DPP、鄰苯二甲酸二己酯 DHXP、鄰苯二甲酸丁基芐基酯 BBP、 鄰苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯 DCHP、 鄰苯二甲酸二(α-乙基)己酯 DEHP、 鄰苯二甲酸二苯酯、鄰苯二甲酸二正 辛酯 DNOP、鄰苯二甲酸二甲酯 DMP、鄰苯二甲酸二乙脂(DEP)
牛瘟病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 ARVCF 英文名稱(chēng): 與犰狳重復(fù)基因 0.2ml
Anti-WNK1 賴(lài)氨酸缺陷型蛋白激酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TBA ELISA Kit 大鼠總膽汁酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-TBX3 轉(zhuǎn)錄因子Tbx3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗IgG 規(guī)格 0.1ml
MSH(Human melanocyte stimulating hormone) ELISA Kit 人黑色素細(xì)胞刺激素 96T
N-cadherin 英文名稱(chēng): N-鈣粘附分子 0.1ml
CARKD 英文名稱(chēng): 碳水化合物激酶結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì) 0.2ml
Anti-KCNA5 鉀電壓閥門(mén)通道混合器相關(guān)亞家族成員5Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SAA3(Human serum amyloid A3) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白A3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MK2/MAPKK2 原活化蛋白激酶激酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KCNC3/Kv3.3 離子通道蛋白Kv3.3 規(guī)格 0.2ml
CORT ELISA Kit 大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮 96T
PHEX 英文名稱(chēng): 維生素D低磷性蛋白 0.2ml
Anti-VDAC/FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴(lài)性陰離子通道IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GSK-3 Beta(Ser21+Ser29) 磷酸化葡萄糖合成激酶3β 規(guī)格 0.1ml
CD46/MCP(membrane cofactor protein)rat, mouse 膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人旋毛蟲(chóng)(Trichinella Ab)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Human Trichinella antibody ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Human Motilin,MTL ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Human vasopeptidase inhibitors,VPI ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Human angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit進(jìn)口/原裝
CKLFH3 英文名稱(chēng): 趨化素樣因子超家族成員3 0.2ml
Anti-phospho-p53BP1(Ser25/29) 磷酸化p53結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
LPA(Human L-phenylalanine) ELISA Kit 人苯丙氨酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Fascin1 纖維束1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Histone H3 (Di Methyl K9) 二甲基化組蛋白H3K9 規(guī)格 0.1ml
BA(Human Blocking antibody) ELISA Kit 人封閉 96T
PMVK 英文名稱(chēng): 磷酸甲羥戊酸激酶 0.1ml