![]() |
- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4041
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4041 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
亞利桑那沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Salmonella arizonae | LZR4041 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
奧斯陸莫拉氏菌TLR9 (Toll-Like Receptor 9) ELISA Kit拉丁屬名: Moraxella osloensis
紅緣層孔菌TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
不等彎孢SAP (Serum Amyloid P Component) ELISA Kit拉丁屬名: Curvularia inaequalis
米根霉CAP1 (Adenylate Cyclase Associated Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus oryzae
膠韌革菌IGFBP-3 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
金黃色葡萄球菌CX3CL1 (Chemokine C-X3-C-Motif Ligand) ELISA Kit拉丁屬名: aureus
米根霉sTfR1 (Soluble Transferrin Receptor1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus oryzae
枯草芽孢桿菌DBP (DNA Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
球形節(jié)桿菌CASP 9 (Caspase 9) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter globiformis
側(cè)孢短芽孢桿菌Ext-N (N-Terminal Extein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
金色鏈霉菌KLK8 (Kallikrein 8) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces Streptomyces
芽孢桿菌屬PRSS33 (Protease, Serine 33) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.
大杯蕈ICAM-4 (Intercellular Adhesion Molecule-4) ELISA Kit 用途: 食用菌,子實體可食用
產(chǎn)堿假單胞菌HLE (Leukocyte Exastase)ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas alcaligenes
盤長孢狀刺盤孢PL (Pancreatic Lipase) ELISA Kit拉丁屬名: Glomerella cingulata
亞利桑那沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 AKIRIN2 英文名稱: AKIRIN2蛋白 0.2ml
Anti-BFGF/FITC 熒光素標(biāo)記堿性成纖維細(xì)胞生長因子IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
OMgp-Ab ELISA Kit 小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-BLNK(p-Tyr96) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人磷酸化T淋巴細(xì)胞連接蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EPHX2 胞漿環(huán)氧化物水解酶 規(guī)格 0.2ml
sEPCR (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 96T
MICS1 英文名稱: 生長激素誘導(dǎo)跨膜蛋白(真皮源性蛋白2) 0.2ml
CASC5 英文名稱: 易感性候選基因5 0.2ml
Anti-EDG4/LPA2 溶血磷脂酸受體蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Apo C3(Human Apolipoprotein C3) ELISA Kit 人載脂蛋白C3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶8Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KCNK TWIK相關(guān)酸敏感鉀離子通道蛋白9 規(guī)格 0.2ml
Human Leishimaria antibody ELISA Kit 人利什曼原蟲 96T
PABP 英文名稱: 多聚腺苷酸結(jié)合蛋白 0.1ml
UPK3A 英文名稱: 尿路上皮特異蛋白3 0.1ml
DLK1 英文名稱: 穿膜蛋白DLK1 0.1ml
Anti-AVEN 凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ECE1 英文名稱: 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1 0.1ml
粘附分子相關(guān)蛋白a1 Anti-CTNNAL1 0.1ml
Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 熒光素標(biāo)記酪氨酸羥化酶IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-HSF1(Ser326) 磷酸化熱休克因子1 規(guī)格 0.1ml
CKLFSF2 isoform 1 英文名稱: 趨化素樣因子超家族成員2亞型1 0.2ml
Anti-OAS1 寡腺苷酸合成酶-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit 人活化蛋白C抵抗素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-PLC gamma 1 (Ser1248) 磷酸化磷酯酶Cγ1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HHV8/ORF K2 人類病毒8 規(guī)格 0.2ml
ET(Mouse endotoxin) ELISA Kit 小鼠內(nèi)毒素 96T
PRRSV-GP5 英文名稱: 豬藍(lán)耳病病毒GP5蛋白 0.1ml