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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4047
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-19
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4047 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
禽沙門氏菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Salmonella gullinarum | LZR4047 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
RhodococcusCTSL (Cathepsin L) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
植物乳桿菌CRH (Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
叢毛單胞菌（可定）DNM2 (Dynamin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Comamonas sp.
金黃色葡萄球菌BAD (Bcl2 Associated Death Promoter) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus aureus
紫云英根瘤菌*GLUT3 (Glucose Transporter 3) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium astragali
藤黃微球菌MCP/CD46 (Membrane Cofactor Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus luteus
巴斯德畢赤酵母HNRPA2B1 (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A2/B1) ELISA Kit用途: 表達(dá)、分泌 磷脂酶
地衣芽孢桿菌Anti-CIIAb (Anti-Type II Collagen Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus licheniformis
極單胞菌屬CD30 (Cluster of Differentiation 30) ELISA Kit拉丁屬名: Polaromonas glacialis
克魯斯假絲酵母SPARC (Secreted Protein Acidic And Rich In Cysteine) ELISA Kit拉丁屬名: Candida krusei
糙皮側(cè)耳ATGA/TGAB (Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus ostreatus
球毛殼菌（可訂購(gòu)）P-GP (Permeability Glycoprotein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
綠木霉NFRκB (Nuclear Factor Related To Kappa B Binding Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
副豬嗜血桿菌S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit 拉丁屬名: parasuis
假單胞菌ANG II R2-Ab (Angiotensin II Receptor 2 Antibody) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
禽沙門氏菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)Phospho-Aurora B (Thr232) + Aurora C (Thr198) 英文名稱： 磷酸化有絲分裂激酶B/C 0.1ml
Anti- Gamma-Adaptin/FITC 熒光素標(biāo)記銜接蛋白γIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit 小鼠環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD86/B7-2 /FITC 熒光素標(biāo)記CD86IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
Ferritin 鐵蛋白 96T
MYO6 英文名稱： 肌球蛋白6 0.2ml
Caspase 2 英文名稱： 半胱胺酸蛋白酶-2 0.1ml
Anti-Lamin B 核纖層蛋白BMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
GHRP(Human Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit 人生長(zhǎng)激素釋放多肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-LFABP/FABP-2 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL25 Kelch樣蛋白25 規(guī)格 0.2ml
PF-3 ELISA Kit 大鼠血小板因子3 96T
PEA3 英文名稱： 瘤促活化因子3 0.2ml
ASCL2 英文名稱： ASCL2蛋白 0.2ml
Anti-CCL28/FITC 熒光素標(biāo)記粘膜相關(guān)上皮趨化因子MECIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
AGEs(Mouse advanced glycation end products) ELISA Kit 小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CCL5/RANTES/FITC 熒光素標(biāo)記調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的因子IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EGF 表皮生長(zhǎng)因子(大鼠) 規(guī)格 0.1ml
c (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 兔心肌特異性肌鈣蛋白T 96T
MNX1 英文名稱： 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元及胰腺同源蛋白1 0.2ml
CLASP2 英文名稱： 細(xì)胞連接相關(guān)蛋白2 0.1ml
Anti-phospho-P53 (Ser6) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Alpha1 Beta-GP(Human Alpha1 Beta glycoprotein) ELISA Kit 人α1β糖蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-PCNA 增殖細(xì)胞核抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HNF4/TCF4/HNF4A 肝細(xì)胞核因子4α 規(guī)格 0.1ml
VB6 ELISA Kit 大鼠維生素B6 96T
PAX4 英文名稱： 配對(duì)盒同源基因4 0.1ml
