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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4161
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-03-14
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4161 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | Theileria orientalis | LZR4161 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸埃希菌Sheep GDF9 (Growth Differentiation Factor 9) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
癭青霉Sheep CA153 (Carbohydrate Antigen 153) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium fellutanum
膜醭假絲酵母Sheep PA-IgM (Platelet Associated Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Candida membranifaciens
香菇Sheep ADA (Adenosine Deaminase) ELISA Kit用途: 食用、藥用
芽孢桿菌Sheep SNCα (Synuclein Alpha) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
白色類諾卡氏菌Sheep EPOR (Erythropoietin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardioides albus
冷桿菌Sheep ANG II R1/AGTR1 (Angiotensin II Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Cryobacterium arcticum
棘抱曲霉Sheep CCL16 (Chemokine C-C-Motif Ligand 16) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus aculeatus
氨桿菌Sheep THRSP (Thyroid Hormone Responsive) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingobacterium wenxiniae
鹽索氏菌Sheep CHAc (Choline acetylase) ELISA Kit拉丁屬名: Thauera phenylacetica
植物乳桿菌Sheep GSP (Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素C型Sheep F8 (Coagulation Factor Ⅷ) ELISA Kit拉丁屬名: perfringens Type C
類布氏乳桿菌Sheep EK (Eepidermal Keratin) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus parabuchneri
球孢白僵菌Sheep PGD2S (Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
土壤球菌Sheep AGA (Anti-Glycolipid Antibody) ELISA Kit用途: 分類、研究，具有用作耐重金屬基因資源潛力。
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 ABHD4 英文名稱： α/β水解酶4 0.2ml
Anti-CD84/SLAMF5/FITC 熒光素標(biāo)記CD84IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
t-PA ELISA Kit 大鼠組織型纖溶酶原激活劑Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ADNP/FITC 熒光素標(biāo)記活性依賴的神經(jīng)保護肽IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FEN1 結(jié)構(gòu)特異性核酸酶FEN1 規(guī)格 0.2ml
ODF(Mouse osteoclast differentiation factor) ELISA Kit 小鼠破骨細(xì)胞分化因子 96T
MGLUR3 英文名稱： 代謝型谷酸受體-3 0.2ml
CCDC89 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白89 0.2ml
Anti-KLK14 激肽釋放酶14Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PC(Human plasma anticoagulant protein C) ELISA Kit 人血漿抗凝蛋白CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-RACK1 受體激活蛋白激酶C1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HDBP2/PTTG1IP 瘤病毒調(diào)控因子1(鋅指蛋白395) 規(guī)格 0.2ml
AQP-2 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2 96T
P51A 英文名稱： 抑制基因p63α 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-dog IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-phospho-STAT3 (Ser727) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
NADPH ELISA Kit 大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AVPR2/FITC 熒光素標(biāo)記精氨酸加壓素受體2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EVC2 膜蛋白EVC2 規(guī)格 0.1ml
CSF(Human colony-stimulating factor) ELISA Kit 人集落刺激因子 96T
Met Enkephalin 英文名稱： 甲硫酸腦啡肽 0.2ml
Connexin-45 英文名稱： 間隙連接蛋白45 0.1ml
Anti-Nogo-B/A 軸索過度生長抑制因子-B/AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
RV(Human RotavirusIgM) ELISA Kit 人輪狀病毒IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-mu Opioid receptor μ-型受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LANCL2 G蛋白偶聯(lián)受體69B 規(guī)格 0.2ml
ER(Human Estradiol receptor) ELISA Kit 人雌二醇受體 96T
P2RX7 英文名稱： 嘌呤受體P2X7 0.2ml
