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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 小鼠正常子宮上皮細(xì)胞；MNUEC/HL-027MurineNormalUterineEpithelialCellsMNUEC/HL-027

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

急性T淋巴細(xì)胞細(xì)胞；TALL-104Oxysophocarpine分子式：C15H22N2O2

人細(xì)胞；A498Lupanine分子式：C15H24N2O

人細(xì)胞；Hela P10s-11FSophoridine分子式：C15H24N2O

人胰腺腺泡上皮癌；HPACScholaricine分子式：C20H24N2O4

人肺鱗癌細(xì)胞；NCI-H520Stephanine分子式：C19H19NO3

人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PC-3M IE82,4,6,6-Tetramethyl-3(6H)-pyridinone分子式：C9H13NO

人低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PC-3M-2B4Crebanine分子式：C20H21NO4

人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PG-BE1Glycozolinine分子式：C13H11NO

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PG-LH7Sinoacutine分子式：C19H21NO4

人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；HCC38Pterolactam分子式：C5H9NO2

人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞；DaoyVallesamine N-oxide分子式：C20H24N2O4

人侵襲性脈絡(luò)膜細(xì)胞；C9181,3-Dihydroxy-4-methoxy-10-methylacridin-9(10H)-one分子式：C15H13NO4

人細(xì)胞；A-427 [A427]Methyl 3-carbazolecarboxylate分子式：C14H11NO2

人侵襲性脈絡(luò)膜細(xì)胞；M619Pachyaximine A分子式：C24H41NO

綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞；HeLa-GFPEchinulin分子式：C29H39N3O2

人侵襲性脈絡(luò)膜細(xì)胞；MuM-2BNeoechinulin A分子式：C19H21N3O2

人侵襲性脈絡(luò)膜細(xì)胞；MuM-2CAxillaridine A分子式：C30H42N2O2

人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞；OCM-1A1,2-Dimethylquinolin-4-one-3-carboxylic acid分子式：C12H11NO3

人低分化；SK-LU-1Sempervirine分子式：C19H16N2

人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；ZR-75-30Vasicinol分子式：C11H12N2O2
小鼠正常子宮上皮細(xì)胞；MNUEC/HL-027MurineNormalUterineEpithelialCellsMNUEC/HL-027供應(yīng)商蘇木 Hematoxylin 規(guī)格：1g

牛膝 Achyranthes bidentata 規(guī)格：1g

川牛膝 Achyranthes bidentata 規(guī)格：2g

羚羊角 Antelope horn 規(guī)格：1g

槐花 Sophora japonica 規(guī)格：1g

芫花 Daphne genkwa 規(guī)格：2g

水蛭(螞蟥) Leech (leech) 規(guī)格：1g

金銀花 Honeysuckle 規(guī)格：0.5g

香附 Cyperus rotundus 規(guī)格：1g

洋金花 Flos Daturae 規(guī)格：1.0g

黨參 Poor man's ginseng 規(guī)格：0.5g

補(bǔ)骨脂 Psoralea corylifolia 規(guī)格：1g