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細(xì)胞名稱(chēng) 昆蟲(chóng)細(xì)胞；Hi-five(BTI-TN-5B1-4)

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞由武漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院胡遠(yuǎn)揚(yáng)教授提交保藏。Hi-five(BTI-TN-5B1-4)細(xì)胞是一株昆蟲(chóng)細(xì)胞，主要用于昆蟲(chóng)病毒的擴(kuò)增、病毒與宿主細(xì)胞相互作用的研究等。

培養(yǎng)條件: Grace＇sInsectMedium(GIMw/oBSA,FCS,WholeEggUltrafiltrate)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C8

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類(lèi)試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn)，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。

3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

AntiP2X1 Receptor　P2X1 受體抗體（25 ul)

AntiP2X1 Receptor　P2X1 受體抗體（0.2 ml)

AntiP2X1 Receptor （extracellular)　P2X1 受體 （胞外)抗體（50 ul)

AntiP2X1 Receptor （extracellular)　P2X1 受體 （胞外)抗體（0.2 ml)

AntiP2X1 Receptor （extracellular)ATTO488　P2X1 受體 （胞外)ATTO488抗體（50 ul)

p27 (phospho Thr187) Polyclonal Antibody　p27 (phospho Thr187)抗體

p27 (phospho Ser10) Polyclonal Antibody　p27 (phospho Ser10)抗體

p21 (phospho Thr145) Polyclonal Antibody　p21 (phospho Thr145)抗體

p120 (phospho Tyr228) Polyclonal Antibody　p120 (phospho Tyr228)抗體

AntiOxytocin Receptor　Oxytocin 受體抗體（50 ul）

FBXL3  FBXL3蛋白抗體    特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Zincon

FBXL5  FBXL5蛋白抗體    特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml 1,3Dimethyl5pyrazolone

FBXL17  FBXL17蛋白抗體    特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Fluazinam

FBXO36  FBXO36 Fbox蛋白相關(guān)蛋白36抗體    特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Flumetralin

FBXO33  Fbox蛋白相關(guān)蛋白33抗體    特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Forchlorfenuron

FBXO11  Fbox蛋白相關(guān)蛋白11抗體    特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Fluroxypyr

FBXL20  FBXL20蛋白抗體    特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Fuberidazole

FBXL16  FBXL16蛋白抗體    特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Florasulam
昆蟲(chóng)細(xì)胞；Hi-five(BTI-TN-5B1-4)供應(yīng)商ATP7B mRNA原位雜交試劑盒

規(guī)格:100T/盒

特異性: 、、

標(biāo)記方式: 3’—尾段標(biāo)記

保存條件: 4°C保存一年

資源名稱(chēng)科氏梭菌

種屬:Clostridium│kluyveri